22.基因表現
核苷酸三連體轉錄,AUCG,核醣體轉譯, m > t > r -RNA MTR
轉錄(Transcription):由DNA造出傳訊者mRNA,起始、延伸、終止 (複製不用岡崎片段)
轉譯(Translation):解碼mRNA核苷酸序列(*20),tRNA識別,rRNA催化,生成對應氨基酸
轉譯(Translation):解碼mRNA核苷酸序列(*20),tRNA識別,rRNA催化,生成對應氨基酸
*真核核糖體(rRNA)由細胞核核仁合成,信號識別粒子SPR識別粗糙內質網膜的相應受體
*原核生物無核膜,製作mRNA(多順反子)時核蛋白體同時附著轉譯,mRNA無轉錄後加工
真核轉錄:細胞核內進行,轉錄也是5'端→3'端。 只DNA其中一股轉錄
起始:RNA聚合酶II和轉錄因子自開口5’~3’搜尋啟動子,解開DNA開始轉錄
DNA轉錄啟動子 TATAAA= [ TATA box ]
延伸:RNA聚合酶3'端→5'端讀取,由5'端→3'端合成新RNA股,可同時轉錄多條mRNA
延伸:RNA聚合酶3'端→5'端讀取,由5'端→3'端合成新RNA股,可同時轉錄多條mRNA
內含子:非編碼無用DNA,負責分開外顯子,轉錄到mRNA但轉譯時被剪去
固定為5-GU....AG-3 ( 5-AU....AC-3 )
外顯子:剪接後保存,可被表現為蛋白質
終止: 轉錄出 AAUAAA本體轉錄終止子,多GC髮夾區,或 ρ-依賴轉錄終止子(Rho),
之後多約30個備用核苷酸,聚合酶失活與DNA分離。
轉錄後加工:
mRNA:5'加帽(5-capping),3'加尾(3-polyA),保護不被水降解、助5’端接合核糖體
甲基化濃縮使不表現
tRNA:剪切5'-、3'-OH端,3'進行連接-ACC;甲基化;脫氨反應,最多修飾核苷酸
rRNA(核糖體RNA):剪切;甲基化;原核生物70S 真核生物80S ; 5SRNA直接參與
剪接:5’3’加保護或修飾後,RNA進行剪接:真核轉錄本有90%非編碼核苷酸(內含子)
剪接訊號:U1snRNA內含子核苷酸剪接點,讓核苷酸產生轉酯化
以snRNPs胞小核糖核蛋白催化剪接體,剪下內含子,辨識+連接兩邊外顯子exon
*DNA聚合酶 I 以 5-3 移除RNA引子,DNA聚合酶 II 協助修復,DNA聚合酶 III負責合成新股
*TFIIH:同時參與DNA 修復及RNA 轉錄
*核糖核酸酶:有酵素功能的RNA=部分小生物自我剪接RNA
*內含子:幫助選擇性剪接組合不同外顯子,無效區域可增加等位基因互換可能=新組合
*外顯子數目=內含子+1 外 內 外 內 外 ; 肌肉內含子:5’GU…AG3’
轉譯: 64種密碼子(幾乎全物種通用):AUG=起始子=甲基胺酸; UAA UGA UAG=終止子
原核轉譯:無核模,細胞質直接轉錄+譯
起始:70S核糖體與mRNA起始密碼子AUG結合,tRNA將氨基酸運至核糖體
起始因子IF-1,2,3,消耗GTP能量啟動
延長:核醣體A位,tRNA-反密碼子和mRNA密碼子互補鹼基配對,組合氨基酸
延長因子EF-Tu ,-Ts, -G,消耗GTP
終止:核糖體遇到三個終止密碼子 (UAA UGA UAG),終止,氨基酸編碼後以肽鍵接合
真核轉譯:核糖體(rRNA)主導,需多種真核起始因子 (eIF1識別AUG,eIF4E識別5’端帽...)
起始:甲硫氨酸起始tRNA結合到40S核糖小亞基上,形成43S前起始複合物,
前起始複合物結合mRNA的5'端,找到起始密碼子AUG,形成48S複合物,
60S核糖體大亞基結合48S,形成80S起始複合物。
tRNA:3'端CCA=胺基酸酯化連接位,5'端磷酸,中段為反密碼子三聯體(與mRNA鹼基互補
20種專一性編碼, 水解ATP形成共價鍵 =胺醯tRNA
搖晃現象:tRNA反密碼子可辨識多個mRNA鹼基
核糖體(蛋白質+ rRNA)轉譯:促進tRNA結合mRNA >轉錄rRNA基因,細胞質蛋白質組裝次單位
核糖體有一個mRNA結合位與三個tRNA結合位(A:結合新tRNA、P:結合帶胜肽練tR、E: tR離開
新胺基酸由成長練C端加入,延伸因子參與,辨識.組裝.移位,辨識和移位(各-1GTP能量)
mRNA自5’~3’滑過核糖體,當A位出現UAA UGA UAG終止子時,釋放因子RF結合終止子,
(作為酵素形成胜肽鍵)水解P位多肽練與tRNA鍵結,自出口隧道釋出 (分裝-2 GTP能量)
*聚核糖體:可一次做出多個mRNA胜肽複本 * GTP~GDP+pi
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